創(chuàng)新藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)Innovative drug target discovery
背景介紹：
絲氨酸和蘇氨酸翻譯后修飾是指蛋白質(zhì)在合成后經(jīng)歷的化學(xué)改性過程，中磷酸化和糖基化是最為常見的修飾形式。絲氨酸和蘇氨酸上的翻譯后修飾類型主要包括磷酸化、O-糖基化等類型。這兩種氨基酸殘基經(jīng)修飾后，能顯著改變蛋白質(zhì)的活性狀態(tài)、穩(wěn)定性及相互作用能力，從而對(duì)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝調(diào)控等多個(gè)關(guān)鍵生物過程起到重要作用。深入研究這些修飾有助于揭示生命活動(dòng)背后的分子機(jī)制，并可能為疾病治療提供新的靶點(diǎn)。因此，絲氨酸和蘇氨酸翻譯后修飾在基礎(chǔ)生物學(xué)研究和臨床應(yīng)用中具有不可或缺的重要價(jià)值。
科絡(luò)思生物具備先進(jìn)的質(zhì)譜技術(shù)，能夠直接且精確地解析多種類型的蛋白質(zhì)翻譯后修飾及其發(fā)生的具體位點(diǎn)。通過巧妙結(jié)合分離富集技術(shù)和同位素標(biāo)記等先進(jìn)手段，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)各類修飾的大規(guī)模、高通量定性和定量分析，為深入研究蛋白質(zhì)翻譯后修飾提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。
技術(shù)平臺(tái)（針對(duì)O-糖基化）：
O-連接的糖基化是將糖鏈轉(zhuǎn)移到多肽鏈的絲氨酸、蘇氨酸的氧原子上的生物化學(xué)過程。利用UDP-GalNAz、Y289L GalT1試劑，這些試劑能夠?qū)⑻腔稽c(diǎn)上的糖分子標(biāo)記上-N3基團(tuán)，后續(xù)通過點(diǎn)擊化學(xué)、酶解、富集等步驟，并借助高分辨質(zhì)譜技術(shù)，能夠精確地鑒定出O-糖基化的具體位點(diǎn)，從而揭示該翻譯后修飾在生物體內(nèi)的重要作用。
我們的優(yōu)勢(shì)：
1.專業(yè)技術(shù)優(yōu)勢(shì)：團(tuán)隊(duì)經(jīng)驗(yàn)豐富，頂級(jí)期刊發(fā)表，提供業(yè)界權(quán)威技術(shù)服務(wù)，個(gè)性化方案，保障最佳實(shí)驗(yàn)效果。
2.嚴(yán)謹(jǐn)質(zhì)量管理：成熟質(zhì)量管理體系，遵循ISO9001標(biāo)準(zhǔn)，確保報(bào)告真實(shí)可信。
3.一站式服務(wù)：覆蓋探針設(shè)計(jì)、合成、靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)、生信分析全流程，咨詢到交付一站式，及時(shí)反饋進(jìn)度，保證客戶滿意度。
4.高性能設(shè)備:配備Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480、Thermo Flsher Q Exactlve HF-X、Bruker timsTOF等先進(jìn)質(zhì)譜儀，助力科研突破。
我們的服務(wù)：
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項(xiàng)目名稱 |
基于高分辨質(zhì)譜的絲/蘇氨酸翻譯后修飾 |
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樣品形式 |
裂解液、活細(xì)胞、組織樣本 |
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硬件平臺(tái) |
VanquishNeo UPLC液相串聯(lián)Orbitrap Exploris 480 mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific)； EASY-nLC1200 UPLC液相串聯(lián)Q E HF-X mass spectrometer (Thermo Fisher Scientific) |
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項(xiàng)目周期 |
4-8周 |
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交付標(biāo)準(zhǔn) |
項(xiàng)目報(bào)告（包含膠圖、位點(diǎn)信息等） |
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價(jià)格 |
咨詢 |
案例展示：
1.O糖基化
項(xiàng)目目的：本項(xiàng)目旨在通過質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)O-GlcNAcylation翻譯后修飾進(jìn)行深入的化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)分析。
解決方案：采用代謝標(biāo)記與質(zhì)譜相結(jié)合的方法，對(duì)O-糖基化的位點(diǎn)進(jìn)行精確且全面的定性分析。在實(shí)驗(yàn)過程中，首先利用熒光膠技術(shù)確定Y289L GalT1酶的量，隨后，按照嚴(yán)格確定的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行質(zhì)譜分析。經(jīng)過兩次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，共同鑒定到了36個(gè)可信的糖基化位點(diǎn)。示例為其中一個(gè)典型的二級(jí)譜圖。
2.N糖基化
N-糖基化是真核生物中最普遍的糖基化形式，它在蛋白質(zhì)折疊、定位、運(yùn)輸、穩(wěn)定性等方面發(fā)揮重要作用。將蛋白變性、還原烷基化、酶切處理后，在H218O緩沖液環(huán)境中使用去糖基化酶處理，則將含復(fù)合型糖鏈修飾的天冬酰胺轉(zhuǎn)化為帶有18O的天冬氨酸，對(duì)該特定修飾變化進(jìn)行鑒定，結(jié)合N-X-S/T motf識(shí)別，確定蛋白的N-糖基化修飾位點(diǎn)。
N糖基化流程圖
N糖基化實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)圖
